เนื้อหา
- เตรียมสารสกัดจากมันฝรั่ง
- ขั้นตอนที่ 1
- ขั้นตอนที่ 2
- ขั้นตอนที่ 3
- เตรียมส่วนผสม
- ขั้นตอนที่ 1
- ขั้นตอนที่ 2
- ขั้นตอนที่ 3
- ขั้นตอนที่ 4
- ฆ่าเชื้อ
- ขั้นตอนที่ 1
- ขั้นตอนที่ 2
- ขั้นตอนที่ 3
- ขั้นตอนที่ 4
- ขั้นตอนที่ 5
- เทส่วนผสม
- ขั้นตอนที่ 1
- ขั้นตอนที่ 2
- ขั้นตอนที่ 3
- ขั้นตอนที่ 4
- ขั้นตอนที่ 5
Potato dextrose agar (BDA) เป็นอาหารกึ่งแข็งอเนกประสงค์ที่ใช้ในการสร้างเชื้อรา นอกจากนี้ยังมักใช้ในการแยกเพาะปลูกและรักษาพันธุ์เห็ดที่กำลังเติบโต คุณสามารถซื้ออาหารสำเร็จรูปหรือหลอดที่มี BDA หรือ BDA ได้อย่างรวดเร็วโดยใช้พรีมิกซ์เชิงพาณิชย์ อย่างไรก็ตามไม่ใช่เรื่องยากที่จะสร้างเวอร์ชันที่เรียบง่ายและมีประสิทธิภาพในราคาประหยัด
เตรียมสารสกัดจากมันฝรั่ง
ขั้นตอนที่ 1
ใส่มันฝรั่งลงในหม้อที่มีน้ำประปาประมาณ 1.2 ลิตรต้มบนเตาประมาณ 1 ชั่วโมง
ขั้นตอนที่ 2
นำกระทะออกจากเตาและปล่อยให้ของเหลวเย็นลงจนกว่าจะสามารถจัดการได้อย่างสบาย (ประมาณสิบนาที)
ขั้นตอนที่ 3
เทสารสกัดมันฝรั่งเหลวผ่านตัวกรองหรือผ้ากอซแล้วเก็บในภาชนะอื่น
เตรียมส่วนผสม
ขั้นตอนที่ 1
เติมเดกซ์โทรสและวุ้นลงในน้ำ 1 ลิตรจากสารสกัดมันฝรั่ง
ขั้นตอนที่ 2
ทดสอบ pH ของสารละลายด้วยกระดาษวัดค่า pH หรือเครื่องวัดค่า pH
ขั้นตอนที่ 3
หาก pH สูงกว่า 6.5 ให้ลดระดับลงโดยการเติมสารละลายกรดไฮโดรคลอริกครั้งละหนึ่งหยดแล้วทดสอบใหม่
ขั้นตอนที่ 4
หาก pH ต่ำกว่า 6 ให้ปรับค่าโดยการเติมสารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ครั้งละหนึ่งหยดแล้วทดสอบใหม่
ฆ่าเชื้อ
ขั้นตอนที่ 1
ผสมให้เข้ากันแล้วแบ่งเป็นชุดเล็ก ๆ 250 มิลลิลิตร เทลงในขวดขนาด 500 มล. สี่ขวด (แต่ละขวดควรเต็มครึ่งหนึ่งเพื่อไม่ให้เดือด)
ขั้นตอนที่ 2
ปิดฝาขวดแต่ละขวดด้วยกระดาษอลูมิเนียมพับหลวม ๆ เพื่อไม่ให้ฟิล์มหลุดออก แต่ยังไม่ทำให้ซีลสมบูรณ์
ขั้นตอนที่ 3
ใส่ขวดลงในหม้ออัดแรงดัน
ขั้นตอนที่ 4
ใช้งานหม้ออัดแรงดันตามคำแนะนำของผู้ผลิตเพื่อฆ่าเชื้อ BDA ที่อุณหภูมิ121º C ที่ความดัน 103.421 Pa (15 psi) เป็นเวลา 15 นาที
ขั้นตอนที่ 5
ปิดหม้ออัดแรงดันและปล่อยให้กลับสู่ความดันบรรยากาศจากนั้นถอดขวดออกและปล่อยให้เย็นจนสามารถจัดการได้
เทส่วนผสม
ขั้นตอนที่ 1
จัดเรียงจานเพาะเชื้อบนพื้นผิวเรียบ
ขั้นตอนที่ 2
เมื่อขวดถูกทำให้เย็นลงจนถึงอุณหภูมิในการจัดการ แต่ก่อนที่ตัวกลางจะเริ่มแข็งตัวให้ถือขวดไว้ในมือข้างหนึ่งและถอดฝาฟอยล์ออกด้วยมืออีกข้างหนึ่ง
ขั้นตอนที่ 3
สำหรับจานเลี้ยงเชื้อแต่ละใบให้ถอดฝาออกด้วยมือข้างหนึ่งแล้วเติม BDA เหลวลงครึ่งหนึ่งอย่างรวดเร็วแล้วเปลี่ยนฝา
ขั้นตอนที่ 4
ทำซ้ำขั้นตอนที่ 3 ด้านบนจนกว่าอาหาร Petri ทั้งหมดจะเต็ม
ขั้นตอนที่ 5
หากมี ADF เหลือให้นำขวดกลับมาใช้ใหม่โดยใช้ฝาใบเดิมปล่อยให้เย็นและแข็งตัวปิดฝาอลูมิเนียมให้แน่นแล้วเก็บในตู้เย็น