วิธีคำนวณ Dead Time ในคอลัมน์ Liquid Chromatography

ผู้เขียน: Rachel Coleman
วันที่สร้าง: 28 มกราคม 2021
วันที่อัปเดต: 23 พฤศจิกายน 2024
Anonim
Retention Time
วิดีโอ: Retention Time

เนื้อหา

โครมาโทกราฟีใช้กันอย่างแพร่หลายในห้องปฏิบัติการเคมีเพื่อตรวจสอบเอกลักษณ์ของส่วนประกอบที่ไม่รู้จัก ส่วนประกอบนี้ไหลผ่านวัสดุห่อคอลัมน์และทำปฏิกิริยากับอนุภาค ปฏิสัมพันธ์ระหว่างอนุภาคและส่วนประกอบในตัวอย่างขึ้นอยู่กับแรงดึงดูดหรือความสามารถในการละลายระหว่างอนุภาคเหล่านี้ โมเลกุลที่ไม่มีปฏิสัมพันธ์กับอนุภาคของวัสดุเปลือกหุ้มได้รับอนุญาตให้ผ่านมันได้โดยไม่มีสิ่งกีดขวาง เวลาที่โมเลกุลต้องผ่านจากจุดฉีดไปยังระบบที่จุดสูงสุดสูงสุดของโมเลกุลที่ไม่ทำปฏิกิริยาคือเวลาตายของคอลัมน์

ขั้นตอนที่ 1

เสริมกำลังตัวอย่างที่ไม่รู้จักด้วยสารประกอบจำนวนเล็กน้อยที่วัสดุคอลัมน์ไม่ถูกกักเก็บไว้ สารประกอบจะผ่านคอลัมน์โดยไม่โต้ตอบกับวัสดุห่อในคอลัมน์


ขั้นตอนที่ 2

ใส่กระบอกฉีดยาด้วยตัวอย่างประมาณ 20 ไมโครลิตรและใส่เข็มฉีดยาลงในช่องฉีด ใส่ห่วงตัวอย่างจากวาล์วโดยเทเข็มฉีดยาลงในวาล์ว

ขั้นตอนที่ 3

เปิดเครื่องมือโครมาโทกราฟีและเริ่มเฟสเคลื่อนที่ เฟสนี้ไหลผ่านเครื่องมือและนำตัวอย่างผ่านคอลัมน์และตัวตรวจจับที่สิ้นสุดในช่องรับของเสีย

ขั้นตอนที่ 4

เปิดใช้งานวาล์วซึ่งทำให้ตัวอย่างเข้าสู่เส้นทางการไหลของของเหลว สิ่งนี้จะโหลดส่วนประกอบตัวอย่างไปที่ด้านบนสุดของคอลัมน์และการแยกจะเริ่มขึ้น

ขั้นตอนที่ 5

ตรวจสอบสัญญาณตัวปล่อยของเครื่องตรวจจับและระบุจุดสูงสุดแรกในโครมาโตกราฟ ความแตกต่างระหว่างเวลาในการฉีดและสูงสุดของจุดสูงสุดแรกซึ่งแสดงโดยส่วนประกอบการเสริมแรงคือเวลาตาย

ขั้นตอนที่ 6

วัดระยะห่างระหว่างจุดฉีดและความสูงสูงสุดของจุดสูงสุดแรก คูณระยะทางด้วยความเร็วของกระดาษหรือแกนเพื่อหาเวลาตาย